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    葡聚糖凝膠 LH-20

    更新:2014-12-30 20:27:06

    中文名:葡聚糖凝膠 LH-20說明書下載暫無
    英文名:Sephadex LH20
    描述:Sephadex LH20是一種價錢較高的填料,特點: 1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經濟地大規模制備各種天然產物 2、結合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結構非常相近的分子 3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
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      貨號規格價格品牌
      GE01100125g490GBCBIO
      GE011001M100g1680GBCBIO
      GE011001L500g7700GBCBIO
    產品介紹

      Sephadex LH20簡介
      全稱為:羥丙基葡聚糖凝膠。常用商品凝膠的一種(另一種為交聯葡聚糖凝膠Sephadex G)。Sephadex LH-20為Sephadex G-25(葡聚糖凝膠按交聯度分類的其中一種商品型號)經羥丙基化處理后得到的產物,此時,葡聚糖凝膠分子中的葡萄糖部分將與羥丙基結合成下列醚鍵形式: -OH → -OCH2CH2CH2OH
      與Sephadex G比較,Sephadex LH-20分子中 -OH 基總數雖無改變,但碳原子數所占比例卻相對增加了,所以Sephadex LH-20不僅可在水中應用,也可在極性有機溶劑或他們與水組成的混合溶劑中膨潤使用。

      Sephadex LH20是一種價錢較高的填料,特點: 1、適合用有機溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經濟地大規模制備各種天然產物 2、結合凝膠過濾、分配色譜及吸附性層析于一身,分離結構非常相近的分子 3、載量可高達300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
      ephadex LH20 的原理
      Sephadex LH20的分離原理是根據分子大小,主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因為凝膠過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強,最后出柱(具體原理可參見分子篩層析)。如果使用反相溶劑洗脫, Sephadex LH20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強,后出柱。如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。

      Sephadex LH20 洗脫溶劑
      Sephadex LH20 洗脫溶劑因分為兩類:反相和正相兩種。經常用的是反相溶劑洗脫,以甲醇/水系統為常見,先用水,逐漸增加甲醇比例,最后用100%甲醇沖柱。正相系統以氯仿/甲醇為較常見,先用50%氯仿/甲醇,逐漸增加甲醇比例,最后用100%甲醇沖柱。
      樣品的處理和洗脫溶劑的選擇
      如果樣品極性大,就選用反相溶劑洗脫(甲醇/水),樣品用最少體積的甲醇/水(盡可能甲醇少一些)溶解,過濾后,濕法上樣(一定要濾喔!要是把Sephadex LH20 堵啦,就得將Sephadex LH20 的柱頭部分棄去,很心痛呀)。如果樣品極性小,這選用正相溶劑洗脫(氯仿/甲醇),樣品用最少體積的氯仿/甲醇溶解,過濾后,濕法上樣。
      分離的技巧
      (1) 分離時流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達;接餾分時可開全速,節省時間。
      (2)柱子盡可能長, Sephadex LH20 柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優勢兵力,打擊敵人。
      (3) 餾分一定要接的細,可1/10,或1/20 個保留體積接成一餾分。
      (4) 洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強的化合物,可洗脫5個保留體積。
      (5)鞣質成分死吸附嚴重,如不在乎填料者,可用Sephadex LH20 分鞣質
      (6)Sephadex LH20 對黃酮類成分的分離效果極佳,方法很成型,有大量文獻參考。
      (7)填料反復使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。暫時不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,最后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長期不用時,可在以上處理基礎上,減壓抽干,再用少量乙醚洗凈抽干,室溫充分揮散至無醚味后,60~80°C干燥后保存。

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